Henrich, Stefan

Röntgenstrukturanalyse der Proproteinkonvertase Furin und der nicht-kollagenen Domäne NC1 von Kollagen IV

X-ray Structural Analysis of the Proprotein Convertase Furin and the Non-Collagenous Domain NC1 of Collagen IV

Thesis

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Schlüsselwörter:

Furin, PC, Proproteinkonvertase, Kristallstruktur, Kollagen IV, NC1, Methionin, Lysin, Seitenkettenverknüpfung, MAD, Kalziumabsorptionskante, Free-Mounting

furin, PC, proprotein convertase, crystal structure, collagen IV, NC1, methionine, lysine, cross-link, MAD, calcium absorption edge, free-mounting

Sachgruppe der DDC
540 Chemie


Dissertation eingereicht bei: Technische Universität München , Fakultät für Chemie, 2004-06-02
Tag der mündlichen Prüfung: 2004-08-04


Abstract in Deutsch

Im ersten Teil der Arbeit wird die Röntgenstrukturanalyse der Proproteinkonvertase Furin aus der Maus beschrieben. Bevor das Phasenproblem mit der Methode der Multiwavelength Anomalous Dispersion (MAD) gelöst werden konnte, waren aufgrund der hohen Mosaizität und der großen Elementarzelle eine Kristalltransformation und eine besondere Meßstrategie erforderlich. Schließlich gelang es die Kristallstruktur von Furin aufzuklären, die hohe Substratspezifität zu beschreiben und die Positionen der Kalziumbindungsstellen in einem weiteren Röntgendiffraktionsexperiment eindeutig zu bestimmen. Basierend auf der Kristallstruktur von Furin wurden weitere verwandte Proproteinkonvertasen modelliert. Der zweite Teil der Arbeit stellt kurz die über ein MAD-Experiment bestimmte Kristallstruktur der nicht-kollagenen Domäne NC1 von Kollagen IV vor. Kollagen IV ist ein wesentlicher Bestandteil von Basalmembranen und besitzt eine neueartige Methionin-Lysin-Seitenkettenverknüpfung.

Abstract in English

The first part of the thesis describes the x-ray structure analysis of the proprotein convertase furin. Before the phase problem could be solved by multiwavelength anomalous dispersion (MAD), a crystal transformation and a special measuring strategy were required because of a high mosaicity and a large unit cell. Finally, it was possible to solve the crystal structure of furin, which gives insight into the high substrate specificity of proprotein convertases. Two calcium binding sites could be determed by diffraction experiments near the absorption edge of calcium. Based on the crystal structure of furin other proprotein convertases were build by homology modelling. In the second part, the crystal structure of the non-collagenous domain NC1 of collagen IV is presented, which was solved by MAD experiments. Collagen IV is a major component of basement membranes and has a novel covalent side-chain cross-link between of methionine and lysine.

Betreuer Huber, R.; apl. Prof. Dr. Dr. h.c.
Gutachter Huber, R.; apl. Prof. Dr. Dr. h.c.
Gutachter Bacher, A.; Univ.-Prof. Dr. Dr.

Upload: 2004-09-28
URL of Theses: http://tumb1.biblio.tu-muenchen.de/publ/diss/ch/2004/henrich.pdf

Technische Universität München, Universitätsbibliothek
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Unversehrtheit der Publikation
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